A、在50×下的视野中均匀分布有大小一致的20个细胞,换用100×后,长度和宽度各变为原来的2倍,视野大小不变,看到的细胞数就相应的减少为原来的4倍,即视野中的细胞数目应该是:20÷4=5个,A正确;
B、细菌或蓝藻是原核生物,无以核膜为界限的细胞核,实验现象不明显,观察结果与真核生物的不相同,B错误;
C、观察叶绿体不用染色,观察线粒体用活体染色剂健那绿,甲基绿是染DNA的,C错误;
D、观察植物细胞质壁分离的实验中,必须是活细胞才能先分离后复原,最好选取洋葱鳞片叶的外表皮,有紫色的大液泡,内表皮无色,D错误.
故选:A.