影响有机染料的柱色谱分离因素主要有哪些

1、吸附剂

硅胶显弱酸性，适于分离酸性和中性化合物，分离生物碱时需在流动相中加入适量的有机碱；氧化铝呈碱性，适于分离生物碱等碱性成分，不宜用于分离有机酸等酸性成分。

2、特异性亲和力

亲和色谱根据生物大分子和配体之间的特异性亲和力，将某种配体连接在载体上作为固定相，而对能与配体特异性结合的生物大分子进行分离。

3、洗脱

除另有规定外，按洗脱剂洗脱能力大小递增变换洗脱剂的品种和比例，分别分部收集流出液，至流出液中所含成分显著减少或不再含有时，再改变洗脱剂的品种和比例。

扩展资料

柱色谱分离吸附剂的要求

一种合适的吸附剂，一般应满足下列几个基本要求:

（1）对样品组分和洗脱剂都不会发生任何化学反应，在洗脱剂中也不会溶解。

（2）颗粒形状均匀，大小适当，以保证洗脱剂能够以一定的流速通过色谱柱。

（3）对待分离组分能够进行可逆的吸附，同时具有足够的吸附力，使组分在固定相与流动相之间能最快地达到平衡。

（4）材料易得，价格便宜而且是无色的，以便于观察。可用于吸附剂的物质有氧化铝、硅胶、聚酰胺、硅酸镁、滑石粉、氧化钙、淀粉、蔗糖和活性炭等。

参考资料来源：百度百科-柱色谱

参考资料来源：百度百科-柱色谱分离

参考资料来源：百度百科-色谱分离技术

柱色谱是较经典的有机物分离技术，
原理和薄层色谱相同，
但装置有所不同，
主要由
一个均匀玻璃柱和填充填料组成，
填料是决定柱效的主要因素，
填料必须满足具有不溶于所
使用流动相、不使欲分离的样品破坏或分解、惰性大、可逆性强和吸附容量大。同时，填料
颗粒直径要均匀。最常见的柱色谱是硅胶色谱、氧化铝色谱、
离子交换柱色谱、聚酰胺柱色
谱和凝胶柱色谱。

分配柱色谱是利用混合物中各组分在两种不相混溶的液体之间的分配系数不同，而得到
分离的方法，分为正相和反相分配色谱两种类型：

正相分配色谱：
以水或亲水性溶剂为固定
（液）相，
以水不相混溶的有机溶剂作移动相的分
配色谱称为正相分配色谱。一般而言，分离水溶性或极性较大的成分，如生物碱、苷类、糖
类、有机酸等化合物，常用正相分配色谱。

反相分配色谱：
以亲脂性有机溶剂作固定
（液）相，
以水或亲水性溶剂作移动相的分配色谱
称为反相分配色谱。
当分离脂溶性或极性较小的成分，如高级脂肪酸、
油脂、
游离甾体等物
质时，常用反相分配色谱。实践中有
70%
以上的分配色谱都采用反相色谱。