首先,确保你的连接是成功的,碰到过有师弟没加连接酶,连接失败的情况;其次,转化过程操作是否正确,看你写的东西,连接液和感受态放在一起培养是个什么情况?第三,如果要检测感受态是否失活,在第二步确保无误码的情况下,转化时加入阳性对照,拿个纯质粒同时转,如果纯质粒都不长,那感受态必然有问题.